Який рецепт для робочого буфера 10X SDS?
Додайте до розчину 30,285 г трис-основи. До розчину додайте 144,4 г гліцину. Додайте до розчину 10 г додецилсульфату натрію (SDS). Додайте дистильовану воду до об’єму 1 л.
10X SDS-PAGE Running Buffer складається з 0,25 М трис-HCl, 1,92 М гліцину та 1% (мас./об.) додецилсульфату натрію (SDS) pH 8,3. Ретельно підготовлений з використанням надчистих реагентів, розчинених у деіонізованій воді фармацевтичного класу.
Я регулярно готую 10% розчин SDS (100 мл). додавання 10 г SDS у 80 мл деіонізованої води, нагрівання при 40-50 °C до розчинення та доведення об’єму до 100 мл. Не автоклавуйте розчин. Також переконайтеся, що порошок SDS повністю розчинився, перш ніж залишити його при кімнатній температурі.
Тріс-буферний фізіологічний розчин (TBS) є чудовим промивним буфером для багатьох типів імуноаналізів. Щоб зробити 1 л основного розчину 10X TBS, розчиніть 24 г Tris і 88 г NaCl в 900 мл води, а потім доведіть pH до 7,6 і кінцевий об’єм до 1 л..
Щоб зробити 1 л основного розчину 10X PBS, об’єднайте 17,8 г Na2HPO4, 2,4 г KH2PO4, 80 г NaCl, 2 г KCl і доведіть кінцевий об’єм до 1 л.. Цей калькулятор рецептів дозволяє точно приготувати 10X PBS для будь-якого міліметрового об’єму.
Так, можна використовувати робочий буфер SDS більше одного разу для електрофорезу. Нещодавнє дослідження Kendrick et al. продемонстрували, що буфер для перенесення, що містить метанол, можна повторно використовувати щонайменше п’ять разів для перенесення білків з SDS-PAGE на полівінілідендифторид [??].