Як працює tet-on Tet-Off?

Система Tet-Off: тетрациклін запобігає зв'язуванню транскрипційного фактора tTA з ДНК на промоторе. Експресія генів пригнічується в присутності тетрацикліну. Система Tet-On: тетрациклін зв’язує фактор транскрипції rtTA і дозволяє йому зв’язувати ДНК на промоторе.

Різниця стосується відповідної відповіді на тетрациклін або доксициклін (Dox, більш стабільний аналог тетрацикліну); Tet-Off активує експресію за відсутності Dox, тоді як Tet-On активується за присутності Dox.

Ферменти ТЕТ каталізують гідроксилювання 5-метилцитозину (5mC) ДНК до 5-гідроксиметилцитозину (5hmC) і можуть додатково каталізувати окислення 5hmC до 5-формілцитозину (5fC), а потім до 5-карбоксицитозину (5caC).

Система Tet є умовною системою експресії генів, де транскрипцію вмикають або вимикають у присутності тетрацикліну або доксицикліну. Він забезпечує дуже жорсткий контроль над експресією порівняно з іншими індуцибельними системами та є оборотним.

TetR пригнічує експресію TetA, мембранного білка, який виводить токсичні для бактерій речовини, такі як Tc, шляхом зв’язування оператора tetA. У Tc-резистентних бактеріях TetA викачує Tc до того, як він зможе зв’язатися з рибосомою, оскільки репресивна дія TetR на TetA зупиняється зв’язуванням Tc з TetR.

Система Tet-Off: тетрациклін запобігає зв'язуванню транскрипційного фактора tTA з ДНК на промоторе. Експресія генів пригнічується в присутності тетрацикліну. Система Tet-On: тетрациклін зв’язує фактор транскрипції rtTA і дозволяє йому зв’язувати ДНК на промоторе.