Чи TCEP кращий за DTT?
TCEP зменшує дисульфідні зв’язки так само ефективно, як дитіотреїтол (DTT), але на відміну від DTT та інших тіолвмісних відновників, TCEP не потрібно видаляти перед певними сульфгідрильними реакційними реакціями зшивання.
Порівняно з двома іншими найбільш часто використовуваними відновниками дитіотреїтолом (DTT) і β-меркаптоетанолом (BME), TCEP має переваги, оскільки він не має запаху, є більш потужним відновником, необоротним (у тому сенсі, що TCEP не регенерує – кінцевий продукт). розщеплення дисульфіду за допомогою TCEP насправді є двома вільними тіолами/…
Можливою альтернативою DTT є трис(3-гідроксипропіл)фосфін(THP); це водорозчинна та стійка на повітрі сполука, яка може відновлювати дисульфідні зв’язки (McNulty, Krishnamoorthy, Amoroso & Moser, 2015).
Що таке TCEP? Трис (2-карбоксиетил) фосфін (TCEP) є відновлюючим реагентом, який використовується в дослідженнях молекулярної біології та біохімії білка. Дослідники часто додають TCEP денатурують білки під час підготовки зразків білка для гель-електрофорезу.
TCEP-HCl є стійкий у водних розчинах і було виявлено, що вони фактично не реагують на інші функціональні групи в білках. TCEP-HCl стійкий до окислення повітрям. TCEP-HCl зменшує дисульфідні зв'язки, а також вільні сульфгідрили в білках і пептидах.
TCEP зменшує дисульфідні зв'язки так само ефективно, як дитіотреїтол (DTT), але на відміну від DTT та інших тіолвмісних відновників, TCEP не потрібно видаляти перед певними сульфгідрильними реакційними реакціями зшивання.
DTT є реагентом, що містить тіол, і це необхідно враховувати при застосуванні, що передбачає маркування тіолами. TCEP заряджається в розчині і не повинен використовуватися в ізоелектричному фокусуванні. Водні розчини TCEP досить кислі (рН 2-3).